在临床微生物学领域，真菌感染的快速、准确诊断对于患者治疗方案的制定具有重要意义。其中，克柔念珠菌（Candida krusei）和光滑念珠菌（Candida glabrata）作为常见的机会性致病真菌，因其对常规抗真菌药物的耐药性较高，常引发严重的侵袭性感染。因此，如何高效、精准地鉴别这两种菌种成为当前研究的热点。

近年来，分子生物学技术的发展为真菌鉴定提供了更为可靠的方法。其中，双重实时荧光定量PCR（qPCR）技术因其高灵敏度、特异性强以及操作简便等优势，逐渐被广泛应用于临床检测中。该方法通过设计特异性引物和探针，能够在同一反应体系中同时检测两种目标菌种，显著提高了检测效率和准确性。

本研究旨在建立一种基于双重实时荧光定量PCR的快速鉴别方法，用于区分克柔念珠菌与光滑念珠菌。实验中，我们选取了多种临床分离株及标准菌株作为样本，利用基因组DNA提取试剂盒进行核酸提取，并针对两者的特异性基因片段设计引物与探针。通过优化反应条件，最终实现了对两种菌种的同时检测。

实验结果表明，该方法具有良好的灵敏度与特异性，在低浓度样本中仍能稳定扩增，且未出现交叉反应。此外，与传统培养法相比，该方法大大缩短了检测时间，适用于临床快速诊断需求。

综上所述，本研究成功构建了一种基于双重实时荧光定量PCR的新型检测体系，能够有效实现克柔念珠菌与光滑念珠菌的快速鉴别，为临床提供了一种高效、可靠的诊断工具。未来，该技术有望进一步推广至更多真菌种类的鉴别与耐药性分析中，助力精准医学的发展。